ELISA试剂盒和抗体对可用于一系列不同的物种,包括微生物、人、昆虫线虫、小鼠、大鼠、豚鼠、田鼠、预、兔、犬、猫、猴、鸡、鸭、羊、鹅、牛、猪、植物、药物农残、胎牛血清、酶
IgG是血清中免疫球蛋白的主要成分,总含量约75%-80%,其中40~50%分布于血清中,其余分布在组织中。 IgG半衰期约为20-23天,为再次免疫应答的主要抗体,通常为高亲和力抗体。 IgG主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成并分泌,主要是以单体形式存在,其分子量约为150KD。 正常人的IgG包括四个亚型,其IgG1占60~70%,IgG2占15~20%,IgG3占5~10%,IgG4占1~7%。
本实验采用双抗体夹心ELISA。 用抗小鼠IgG total单克隆抗体预包被酶标板, 加入适度稀释的样本和标准品,其中的IgG total会与其单抗结合,洗去游离成分; 加入酶标抗体,酶标抗体与结合在单抗上的小鼠IgG total结合而形成免疫复合物,洗去未结合的酶标抗体; 加入显色剂,若反应孔中有IgG total,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色; 加终止液变黄。 在450nm下测OD值,IgG total浓度与OD450值之间呈正比, 可通过绘制标准曲线计算出标本中IgG total浓度。
未启封试剂盒2-8℃保存有效期6个月,启封后建议一个月内使用完毕。 产品收到后标准品-20ºC保存,其它组分2-8℃保存
1、试剂盒保存在2-8℃,除复溶后的标准品,其它成分不可冷冻。 2、浓缩酶标抗体装量极少,运输中颠簸和可能的倒置会使液体沾到管壁或瓶盖。使用前请离心处理以使附着于管壁或瓶盖的液体沉积到管底。 3、不同批号试剂不可混用。 4、为避免交叉污染请使用一次性吸头。 5、终止液和显色剂具腐蚀性,避免皮肤及粘膜直接接触,一旦接触到这些液体,请尽快用大量水冲洗。 6、使用干净的塑料容器配制洗涤液,使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 7、洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 8、不要用其它来源的试剂混合或替代该产品的组分,不同批号的试剂盒组份不能混用,请在有效日期内使用本产品。 9、在试验中标准品和样本检测时建议作双复孔或三复孔,加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应孔孵育的时间一样。 10、充分混匀对反应结果尤为重要,最好使用微量振荡器(使用最低频率进行振荡)。 11、避免操作过程中酶标板干燥,干燥会使酶标板上生物成分迅速失活,影响实验结果。 12、适当的稀释样品,使样品值落在标准曲线范围内,根据待测因子含量高、中、低的不同, 建议采用1:100、1:10、1:2稀释样品。如果样品OD值高于最高标准,适当增加稀释度并重复检测。 13、标准品稀释液,操作人,移液方式,洗涤方法,孵育时间及温度,试剂盒批次的不同均可能会导致结果的差异。 14、此法可有效的消除可溶性受体、结合蛋白以及生物样品中的其他因素的干扰。